KEL Biotech™ 流式抗体TRBC1的应用

TRBC1在成熟T细胞淋巴瘤中的表达特点及诊断价值

TRBC1是T细胞受体β链恒定区1（TCellReceptorBetaConstant1）的缩写，与免疫系统中T细胞的功能密切相关，以下是关于它的详细介绍：

 

TRBC1的基本概念

所属家族：属于T细胞受体（TCellReceptor,TCR）β链基因家族的一部分。TCR是T细胞表面的特异性受体，负责识别抗原呈递细胞（APC）呈递的抗原肽-MHC复合物，从而启动免疫反应。

基因定位：人类TRBC1基因位于染色体7q35区域，与TRBC2基因相邻，二者共同参与TCRβ链恒定区的编码。

结构与功能：TRBC1编码TCRβ链的恒定区，该区域不直接参与抗原识别，而是在TCR与抗原结合后，通过与CD3复合体相互作用，传递细胞活化信号，促使T细胞增殖、分化并发挥免疫效应。

 

TCR的组成与TRBC1的作用

TCR的结构：TCR通常由α和β链（或γ和δ链）组成，每条链包含可变区（V区）和恒定区（C区）。

可变区：由V、D、J基因片段重排形成，决定抗原识别的特异性。

恒定区：由TRBC1或TRBC2等基因编码，连接可变区与CD3复合体，介导信号传导。

 

TRBC1与TRBC2的差异：

二者编码的恒定区氨基酸序列略有不同，但功能相似，均参与TCR-β链的组装和信号传递。

在T细胞发育过程中，TRBC1和TRBC2的表达可能受不同调控机制影响，但最终均能形成功能性TCR。

 

TRBC1与免疫相关疾病的联系

T细胞发育异常：TRBC1基因的突变或表达异常可能影响T细胞的成熟和分化，导致免疫功能缺陷或自身免疫性疾病。

疾病研究靶点：在某些免疫相关疾病（如自身免疫性关节炎、多发性硬化症等）中，T细胞的异常活化与TRBC1参与的信号通路相关，因此TRBC1可能成为潜在的研究靶点。

 

研究意义与应用

免疫学基础研究：通过研究TRBC1的结构和功能，有助于深入理解T细胞活化的分子机制及免疫系统的调控原理。

临床应用前景：在免疫治疗领域，针对TRBC1相关信号通路的干预可能成为调节T细胞功能的新策略，例如在肿瘤免疫治疗中增强T细胞的杀伤活性。

 

总结

TRBC1作为TCR-β链恒定区的编码基因，在T细胞介导的免疫反应中扮演关键角色，其功能与T细胞的活化、信号传导及免疫应答密切相关。对TRBC1的深入研究有助于揭示免疫系统的工作机制，并为免疫相关疾病的诊断和治疗提供新的思路。

 

T细胞受体恒定β链重排概述

TCR和Ig受体是抗原结合受体，对适应性免疫至关重要，因为它们能识别和结合多种病原体。这是通过一个称为体细胞重组的过程实现的，体细胞重组发生在细胞个体发育过程中，涉及编码TCR和Ig受体的种系基因的重排。因此，每个T细胞和B细胞表达一种独特的TCR或Ig受体。如果由于良性免疫反应或恶性免疫反应而被激活或自身免疫变化，细胞可能发生克隆扩增。每个子细胞将携带一个相同的TCR/Ig受体，这个指纹可以用来诊断克隆的存在。

TCR是一种跨膜蛋白，由两条二硫连接的多肽链组成：α链和β链，或者在约5-15%的T细胞中，有γ链和δ链。每个多肽链由一个变量区和一个恒定（C）区组成。可变区包含抗原结合表位，使每个细胞（或克隆）具有独特的受体结构。T细胞克隆的存在可以通过PCR检测，使用针对不同V、D和J段设计的引物，从而扩增出跨越这些独特序列的产物。理论上，任何TCR链（α， β， γ或δ）都可以用作模板。然而，在实践中，TCRγ和TCRβ链是靶向的。这是由于TCR基因重排在T细胞个体发生过程中的组织方式：TCRδ位点首先重排，其次是TCRγ位点。这将产生功能性γδTCR蛋白，或者随后发生TCRβ基因座重排、TCRδ基因座缺失和TCRα基因座重排。反过来，这可能导致αβTCR蛋白的功能。TCRγ重排位点在几乎所有T细胞中都有保留，包括αβTCR+T细胞，其基因结构比α或βTCR位点更简单。因此，TCRγ位点主要用于T细胞克隆性评估。此外，TCRβ也用于这一目的，并且优于α基因座，因为α基因座中的V和J片段数量要多得多：与β基因座中的64V和14J片段相比，至少有70V和61J片段。

相比之下，TCR的C区不是识别抗原的直接结构的一部分。C区基因座编码TCR链的胞外恒定结构域、连接肽、跨膜结构域和最小胞内结构域。α链和γ链各有1个C区基因片段；β链和δ链各有C1和C2两个片段。因此，任何给定的T细胞上的αβTCR将具有含有C1或C2的β链。由于经过克隆扩增的t细胞衍生的所有子细胞将携带相同的TCR，因此用TCRβC1或TCRβC2特异性抗体标记克隆群体将导致阳性或阴性信号（图1），这与用于B细胞分析的kappa/lambda标记方法没有什么不同。据我们所知，只有一种市售抗体具有已知的TCRβ C区域(也简称为TRBC)特异性：TRBC1结合单克隆抗体JOVI.1。

 

JOVI.1 （抗TRBC1）抗体的研制与鉴定

市场上可获得的抗人TRBC1抗体产生杂交瘤是由Viney等人在近30年前创造的[1]，当时他们希望产生针对人TCR不同Vβ区域的特异性单克隆抗体。TCR可变区免疫原性较差，因此，他们没有使用人细胞或纯化的TCRβ链蛋白作为免疫原，而是使用转染了由鼠α链和人β链组成的TCR结构的小鼠细胞系作为免疫原，该结构由Vβ3、Dβ1、Jβ1.2和Cβ1组成。其中一个被命名为JOVI.1的杂交瘤产生了一种IgG2a抗体，该抗体当时被认为与大多数TCR上的“决定因素”结合。然而，这些早期研究并没有得出TRBC1特异性的清晰图像。例如，用杂交瘤培养上清和山羊抗小鼠FITC抗体标记的外周血或T细胞系流式细胞术分析显示，CD4+T细胞从阴性到阳性不等，CD8+T细胞标记为双相阳性或阴性。已知TRBC1阳性细胞系与抗体反应；然而，一些TRBC2表达细胞系也表现出反应性，尽管较弱。由于其T细胞有丝分裂特性或免疫沉淀，后续研究通常使用该抗体。Maciocia等人最终于2017年发表了纯化抗体对TRBC1特异性的证据。该小组寻找TCRβ恒定区特异性抗体，目的是创建仅针对TRBC1或TRBC2表达的CAR-T细胞，这种策略可能允许T细胞定向CAR-T细胞治疗，而不会完全耗尽患者的T细胞区和适应性免疫。已知两个β链C片段的序列和基因组组织非常相似，这可能增加了高度特异性mab的开发难度。因此，Maciocia等人使用市售的JOVI.1抗体对表达多种克隆TCR构建体的细胞系进行了广泛的研究。这证实了没有标记TCR恒定区2，而且，JOVI.1与恒定区1的结合不依赖于任何特定的TCRβ连接段。

 

KEL Biotech™ 实验数据：

 

 

T细胞白血病和淋巴瘤，统称为T细胞癌，在全世界范围内，每年新增约100000名患者。成年的复发性T细胞癌患者的5年生存率为7%-38%，他们的治疗选择有限。相比之下，B细胞癌患者有一系列靶向泛B细胞抗原的新型抗体药物和CAR-T细胞疗法，从而提高了生存率。但开发针对T细胞癌的类似治疗方法却一直具有挑战性。

正常和肿瘤性T细胞或B细胞的细胞表面表达类似的抗原，靶向泛B细胞抗原是可行的，因为治疗导致的正常B细胞再生障碍被良好耐受。然而，靶向泛T细胞抗原是不可行的，因为这会导致严重的免疫抑制。因此，T细胞癌的治疗需要更特异性地靶向癌变T细胞。

临床前研究表明，靶向T细胞受体β-链恒定区1（TRBC1）可以杀死癌变T细胞，同时保留足够的健康T细胞来维持免疫功能，这使得TRBC1成为治疗T细胞癌的有潜力的靶点。然而，首次在人类中进行的抗TRBC1 CAR-T细胞疗法临床试验报告了低反应率和CAR-T细胞的不明原因丢失。

2024年3月27日，约翰-霍普金斯大学医学院 Suman Paul 团队在 Nature 期刊发表了题为：TRBC1-targeting antibody–drug conjugates for the treatment of T cell cancers 的研究论文【1】。

该研究证实了抗TRBC1 CAR-T细胞由于被患者正常的TRBC1+ T细胞杀死而丢失，从而导致治疗反应不佳。为了解决这个问题，研究团队开发了一种靶向TRBC1的ADC药物，可以在体外杀死TRBC1+癌细胞，并在小鼠模型中治愈了人类T细胞癌。靶向TRBC1的ADC药物可能为TRBC1靶向提供最佳形式，并在T细胞癌患者中产生优异应答。

 

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